香丹骨折端注射促进骨痂生长过程中TGF-β、bFGF的表达及骨密度实验研究(2)
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表2 实验侧与对照侧不同时间bFGF的表达(平均灰度值)
3 讨论
骨折愈合是复杂的骨组织完全性再生过程，其修复的组织学过程包括血肿、炎症、骨膜反应、膜内成骨、软骨形成、软骨内成骨、骨塑形等阶段，其中伴随着复杂的生物学调节机制，大量细胞因子在不同的骨折修复阶段发挥不同的作用。许多动物试验证实，骨折愈合的不同时段会有不同的生长因子的表达。其中主要有 TGF-β、BMP、FGF、PDGF、VEGF 和 IGF 等[2]。本实验选取 TGF-β、bFGF 观察其在骨折愈合过程中表达和分布情况。TGF-β 是一族具有多种功能的蛋白多肽，广泛存在于多种组织及转化细胞中，其中以骨组织、血小板、软骨组织中含量最丰富。TGF-β 可促进细胞增殖与分化，促进细胞外基质合成，也是多种免疫细胞的自分泌或旁分泌调节因子[3]。在骨折修复初期，TGF-β 既从脱颗粒的血小板中释放出来，也在软骨痂中由增生分化的细胞合成，然后通过诱发成骨细胞的活性和增殖，直接刺激膜内成骨，并且激发成骨细胞合成Ⅰ型胶原和骨连接素。同时 TGF-β 也是最有效的化学趋化因子[4]。FGFs是一组肝素粘合多肽，有促进成纤维细胞分裂的作用。主要有两种形式，分别是aFGF和bFGF。aFGF主要促进软骨细胞增生，而bFGF主要促进成骨过程[5]。在骨折修复早期，bFGF一方面使骨组织中的成骨细胞大量增殖分化，促进骨折愈合；另一方面促使成纤维细胞有丝分裂，直接参与纤维骨痂的形成。bFGF通过跨膜酪氨酸激酶类受体发挥作用。
3.1 香丹注射液的组成及有效成份
香丹注射液(复方丹参注射液)是由丹参、降香提取物组成，其有效成份丹参酮，丹参素、原儿茶醛，一没药烯等。丹参功同四物具有活血化瘀、凉血止痛、安神消痛等作用。现代研究已证实，丹参能刺激小血管扩张，改善微循环，改善组织缺氧等作用，应用丹参可以减少骨折局部的早期血肿及增加骨折局部血液循环，从而产生一个对骨折有利的影响[5]。
3.2 香丹注射液促进骨折愈合的作用机制
3.2.1 疏通微循环、改善缺氧、增进骨折局部的血管量 良好的血运循环为骨折修复提供能源和营养物质，同时也有利于瘀血的消散，代谢产物的清除，及炎症和坏死组织的吸收[6]。
3.2.2 促进血肿的吸收、机化 血肿是骨折后的一个必然结果。骨折局部的血肿吸收和机化，是骨折愈合过程中的重要环节，血肿吸收越快，机化越迅速，其骨折愈合也就越快。本实验发现，香丹组在15天时骨折缺损区血肿基本吸收、机化、而伤科接骨片组在15天时缺损区仍有少量小血管，空白组在15天时骨缺损区仍有未机化血肿。
3.2.3 促进钙盐沉积 缺乏将足量钙质输送到断端的血供，进而导致软骨痂钙化障碍，是骨折不愈合的真正原因[7]。本研究表明，香丹能明显改善血运循环，使局部血流量增加可以加速钙盐的沉积。另外BMD、BMC测定，间接反映钙盐沉积状况。骨折早期香丹组不如对照组，但骨折22d香丹组大为改观已与对照组同步，骨折31d时香丹组明显好于对照组和空白组。
参考文献
[1]陈奇.中药药理实验方法.北京:人民卫生出版社,1994:217
[2] Khan SN, Bostrom MP, Lane JM. Bone growth factors.Orthop Clin North Am, 2000,31:375-388.
[3] Wildemann B, Schmidmaier G, Brenner N, et al.Quantification, localization, and expression of IGF-Iand TGF-beta1 during growth factor-stimulated fracturehealing. Calcif Tissue Int, 2004,74:388-397.
[4] Yu Y, Yang JL, Chapman-Sheath PJ, et al ......
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